货号: abs60288
产品介绍:
该产品是专门用于提取口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等样本RNA的试剂盒。它采用独特的消化液消化组织、细胞中的蛋白质,使样本RNA的释放更加充分。试剂盒采用了我们自己研发的改性硅基磁珠,核酸吸附能力强,提取RNA纯度高。试剂盒操作简便快速,特别适用于一次试验较多样本的批量提取。与同类产品相比,提取得到的RNA纯度更高,产量更大,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
产品特点
1. 操作简便快速,可在20分钟内获得理想的RNA;
2. 提取RNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.8-2.0;
3. 产率高,同样的样本量提取的RNA更多;
4. 可用于各种口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液样本中RNA的提取,提取后的RNA可用于核酸检测使用;
展开剩余70%5. 不含苯酚和氯仿等有毒溶剂,安全无毒。
操作步骤
请自行准备:无水乙醇、生理盐水、1M NaOH、无 RNA 酶 1.5mL 离心管。 取出析出液和洗涤液,按以下操作: a) 析出液:5mL 加入 25.5mL 无水乙醇,混匀;9mL 加入 51mL 无水乙醇,混匀。 b) 洗涤液:9mL 加入 21mL 无水乙醇,混匀;18mL 加入 42mL 无水乙醇,混匀。 c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在 37℃溶解,摇匀后使用。 样本处理: a) 拭子:向无 RNA 酶的 5mL 离心管中加入 800μL 生理盐水,将拭子收集的样本置于生理盐水中,涮洗 20 秒,使细胞完全脱落,贴离心管壁挤干拭子上的液体,12,000 rpm 离心 5 min,弃 700μL 上清,剩余 100μL 上清,充分振荡混匀。 b) 痰液:向收集的痰液中加入 4 倍体积 1M NaOH,室温放置 30 分钟,每 10 分钟振荡混匀一次(如痰液仍粘稠,可适当延长液化时间),12,000 rpm 离心 5 min,弃上清,剩余 100μL 上清,充分振荡混匀 15 秒。 加入 200μL 裂解液和 20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴 10 分钟。 加入 500μL 析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响 RNA 的提取与后续实验。 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液吸入吸附柱内,静置 2 min,12,000 rpm 4℃离心 1 min,弃收集管内废液。 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液至吸附柱内,静置 2 min,12,000 rpm 4℃离心 1 min,弃收集管内废液。 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心 2 min,离去残留的洗涤液。 取出吸附柱,放入新的 1.5 mL 无 RNA 酶离心管内,加入 30-50 μL 洗脱液,静置 3 min,12,000 rpm 4℃ 离心 2 min,收集 RNA 溶液。 -70℃保存,或直接用于下一步实验。储存/保存方法
室温(10-30℃)保存,有效期为 12 个月,消化液请于-20℃存放,避免反复冻融;有效期1年。
试剂盒组成:
组份50T100T吸附柱和收集管各50个各100个裂解液12 mL24 mL析出液4.5 mL9 mL洗涤液9 mL18 mL洗脱液3mL6 mL消化液1.1 mL2.2 mL
注意:
为防 RNA 酶污染,实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩,使用处理过的无 RNA 酶的容器和无 RNA 酶的超纯水。 析出液、洗涤液均含有刺激性化学物质,请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于 37℃水浴中溶解即可温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
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